Ambrosini gilt als hart arbeitender und immer mit vollem Einsatz spielender Mittelfeldspieler. Obwohl er bereits 1995 zum AC Milan stieß, schaffte er es erst in der Saison 1999/2000 sich in der Mannschaft zu etablieren. Zuvor sammelte er, ausgeliehen an andere Clubs, Spielpraxis. Bei der EM 2000 war er dabei, fehlte aber auf Grund einer schweren Knieverletzung bei der WM 2002. Diese Verletzung warf ihn auch wieder ein bisschen zurück. Er kämpfte sich zurück in die Mannschaft und gewann 2003 die Champions League.